期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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首页>中国输血杂志
- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
重组人干细胞因子在原核系统中高效表达的策略
郭斯启；奚永志；崔建武；习彩霞；刘楠；梁飞；孔繁华
关键词：干细胞因子, 重组, 大肠杆菌, 高效表达
摘要：目的探索并建立人干细胞因子(SCF)的原核高效表达系统.方法设计特异性引物,以RT-PCR从人胎肝组织中扩增出干细胞因子的膜外区活性片段,克隆进入pGEM-T载体.以Goldkey软件进行翻译起始序列RNA结构和自由能优化;通过合成寡核苷酸和PCR技术将SCF cDNA中的原核稀有密码子定点突变为同义的高频密码子;酶切连接构建多种原核表达载体并比较它们在宿主菌中诱导表达结果.表达产物经SDS-PAGE、Western Blot和MTT活性鉴定.结果扩增SCF膜外区序列测定正确.构建的原核表达载体pET32a(+)-SCF在大肠杆菌中获得高效融合表达,表达产量达30%以上,Western B1ot鉴定正确,初步纯化产物的活性与标准品相似.结论根据使用的载体/宿主系统,翻译起始序列(TIS)的RNA结构和自由能优化、稀有密码子突变对表达无影响;SCF基因在5'端融合要比3'端融合表达效率高.
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