期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
K562细胞RNA负载人树突状细胞后体外诱导特异性CTL的研究
高跞；范华骅；陆华中；聂晓绚；龚裕春；刘嬿；高峰
关键词：树突状细胞, K562细胞, RNA, 转染, T淋巴细胞, 细胞毒, 培养
摘要：目的探讨人的树突状细胞(dendritic cell, DC)体外经K562细胞株总RNA转染后,能否诱导出p210蛋白表达,并诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL).方法自健康人浓缩白细胞制品(白膜)分离有粘附特性的单核细胞(PBMC),经GM-CSF、IL-4培养5d后,获得未成熟的DC(imature DC,imDC);体外以脂质体DOTAP或直接电穿孔转染K562细胞总RNA.抽提转染前后以及转染24h后的DC内RNA 进行RT-PCR检测,Western-blot分析p210蛋白表达,以及诱导CTL杀伤K562细胞功能检测等.PBMC以每组5×106/ml,分别在不同组分的培养液中培养DC,通过细胞计数、流式细胞仪测定CD1a表达、细胞纯度来估计制备效果.结果 RT-PCR检测表明:DC经K562总RNA转染后,细胞内出现Bcr-Abl的cDNA条带,24h后消失.Western-blot试验表明:转染24h后,开始表达p210特征性蛋白;并且明显促进T细胞对K562的杀伤活性.1%自体血浆体积分数RPMI 1640培养的DC的CD1a表达量高,并且细胞获得数量也仅屈居第二,为总体评价较高的一组.结论应用肿瘤总RNA负载DC来制备DC疫苗具有可行性,预示改良的DC疫苗抗肿瘤的广泛应用前景.
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