期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
人凝血因子V的纯化
柳胜华；林方昭；马莉；刘自强；李长清；肖小璞
关键词：凝血因子V, 冰冻血浆, 新鲜, 纯化, 酶抑制剂
摘要：目的 分离纯化人血浆中凝血因子V(FV),为研制FV单克隆抗体提供抗原.方法 在1 L新鲜冰冻血浆中加入酶抑制剂Benzamidine hydrochloride、二异丙基氟磷酸(DFP)和胰蛋白酶抑制剂,使其终浓度分别达到2mmol/L、1 mmol/L和50 mg/L;采用柠檬酸钡吸附、聚乙二醇6000分级沉淀、DEAE-Sepharose FF离子交换层析和Sephacryl-S300凝胶过滤层析,对血浆中FV进行分离纯化;采用凝血测定一期法检测FV活性;采用紫外分光光度法测定纯化FV的蛋白含量;采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察FV的纯化情况.结果 经过对血浆前处理和两步层析后,FV活性回收率为(11.21±3.54)%,比活性为(30.46±0.31)U/mg,浓缩倍数为(2 538.33±25.83)倍(n=3);SDS-PAGE图谱显示:原料血浆添加DFP的离子交换层析样品较之未加DFP的样品在330 kD处有更粗更清晰的蛋白条带,终纯化的FV样品仅在330 kD附近有1条较深的蛋白条带.结论 本FV纯化方法能够较有效地浓缩血浆中的FV.
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