期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
重组人凝血因子Ⅶ的纯化与鉴定
吕茂民；王卓；冯晶晶；章金刚
关键词：亲和层析, 重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ), 纯化, 单克隆抗体
摘要：目的 建立重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ)的纯化方法.方法 首先将制备并纯化的单克隆抗体与CNBrSepharose 6B Fast Flow介质偶联,制备单克隆抗体亲和层析柱,并用rhFⅦ品验证层析柱的层析效果;采用DEAE-Sephadex A-50吸附细胞表达的上清,对吸附产物用Sephadex G-25脱盐桂做脱盐处理;然后用单克隆抗体亲和层析柱做亲和层析;通过SDS-PAGE、Western Blot等试验测定纯化产物的纯度;通过凝血酶原时间(PT)测定纯化产物的促凝活性.结果 制备出rhFⅦ单克隆抗体亲和层析介质;细胞表达产物经DEAE-Sephadex A-50、Sephadex G-25脱盐和亲和层析纯化后,经SDS-PAGE鉴定获得了分子量为50 kD的单一蛋白洗脱峰;纯化所获得的重组蛋白具有促凝活性,促凝时间(DT)为52 s.结论 建立了纯化rhⅦ的亲和层析方法,为rhFⅦ的研制奠定了基础.
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