期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
人血浆凝血因子Ⅶ单克隆抗体的制备与应用初探
徐世洲；肖玲；肖小璞；赵青蓉；侯玉香；林方昭
关键词：凝血因子Ⅶ, 单克隆抗体, 杂交瘤细胞株, 磁微粒, 纯化, 制备
摘要：目的 制备能稳定分泌人凝血因子Ⅶ(FVD)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化人FⅦ单克隆抗体并初步应用.方法 1)以纯化的人血浆FⅦ抗原免疫BALB/c小鼠,用杂交瘤技术筛选出能分泌人FⅦ单克隆抗体的细胞株,用体内诱生法制备小鼠腹水,经硫酸铵沉淀、DEAE-affi-gel-blue凝胶层析纯化单克隆抗体;鉴定抗体的纯度和亚类、抗体与FII,FIX、FX的交叉反应性、二价金属离子对抗原抗体结合的影响等特性.2)将人FⅦ单克隆抗体连接到GoldMag-@磁微粒表面,检测连接效率;将磁微粒连接的抗体与FⅦ反应,并用含有二价金属离子的缓冲液进行洗脱,探索用磁微粒-单克隆抗体免疫亲和吸附法纯化FⅦ的方法和可行性.结果 1)成功制备出22株分泌人FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为HFⅦ001～022;所选取的HFⅦ9002、004、005、013、014、021等6株细胞制备的纯化的杭体,其重链的亚类均为IgG1,除与FⅦ反应外,均不与FII、FIX、FX发生交叉反应,其中HFⅦ005,可以抑制血浆FⅦ的凝血活性,HFⅦ002、004、005与FⅦ的结合明显受Zn2+的抑制.2)上述6株细胞抗体与磁微粒的连接率为24.0%94.7%,HFⅦ002、005、013等3株细胞抗体连接磁微粒后可以结合FⅦ,对其中1株磁微粒连接抗体(HFⅦ005)进行试验显示;其结合的FⅦ在有Zn2+存在时能解离下来.结论 制备出能分泌人血浆FⅦ单克隆抗体的杂交瘤细胞株并纯化出单克隆抗体;应用磁微粒一单克隆抗体免疫亲和吸附法,可以分离纯化人FⅦ.
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