期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
人凝血因子Ⅶ基因在CHO-K1细胞中的瞬时表达与鉴定
肖薇；赵睿；李长清；曹海军；刘彬；肖小璞；林方昭
关键词：人凝血因子Ⅶ, CHO-K1细胞, 克隆, 基因表达
摘要：目的 在CHO-K1细胞中瞬时表达所克隆的人凝血因子Ⅶ(FⅦ)的cDNA序列并表达其产物.方法 首先从HepG2细胞中克隆人FⅦ cDNA序列,将克隆得到的序列连接到pMD18-T载体上经测序验证后,将其与pcDNA3.1载体连接,构建得到重组表达质粒pcDNA3.1-FⅦ.将构建得到的表达质粒瞬时转染CHO-K1细胞,72 h取样,采用ELISA、Westem blotting等方法对细胞上清液和细胞裂解物作鉴定.结果 克隆得到的序列经NCBI比对后为FⅦ转录突变体Ⅱ基因序列,克隆得到的基因未见氨基酸突变,重组表达质粒pcDNA3.1-FⅧ经PCR、双酶切、测序验证正确.ELISA法未在上清中检测到目的蛋白,而在细胞裂解液中检测到了目的蛋白；Western blotting 检测到表达产物有与FⅦ标准品类似的分子量为50 kD左右的特异性条带.结论 在转染后的CHO-K1细胞裂解液上清中成功表达了hFⅦ蛋白.
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