期刊简介

               本杂志系中华人民共和国卫生主管,中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物,中文临床、特种医学类核心期刊,中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康,以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就,多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。                

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  • 杂志名称:中国输血杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
  • 国际刊号:1004-549X
  • 国内刊号:51-1394/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
中国输血杂志2013年第09期

应用磁性分选方法从人脐血中分离极小类胚胎干细胞

王芳;刘晋辉;何吉;朱发明;吕杭军

关键词:极小类胚胎干细胞, 脐血, 磁性分选
摘要:目的 建立从人脐血中分离极小类胚胎干细胞的磁性分选方法.方法 脐带血标本与0.9%生理盐水以1∶1充分混匀,形成单细胞悬液层加到比重为1.077 g/mL的淋巴细胞分离液上,经密度梯度离心收集单个核细胞层.应用Lineage Cell Depletion Kit、CD45 MicroBeads、CD133 MicroBead Kit和CD34 MicroBead Kit进行磁性分选.应用流式细胞术分别检测分选的细胞群的表面标志.利用兔抗人Oct4与Nanog单克隆抗体和鼠抗兔IgG二抗分别检测分选细胞核内Oct-4和Nanog表达.RT-PCR检测分选细胞的Oct-4和Nanog mRNA表达.通过与人正常红细胞比较分析细胞大小.结果 磁性分选获得Lin-CD45-CD133+和Lin-CD45-CD34+这2群细胞.免疫荧光法检测显示这2群细胞中均表达Oct-4和Nanog.RQ-PCR结果显示2群细胞均表达Oct-4和Nanog转录子.瑞氏染色镜下可见Lin-CD45-CD133+和Lin-CD45-CD34+这2群细胞大小比正常红细胞小,且核质比高.结论 应用磁性分选方法可获得表达Lin-CD45-CD133+和Lin-CD45-CD34+的极小类胚胎干细胞.