期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中国输血杂志
- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)培养方案的优化
徐利强；李建华；倪修文；吴马剑；孙亚云；吴瑾惠
关键词：细胞因子诱导的杀伤细胞, 外周血单个细胞, 激发型, 增殖, 优化
摘要：目的 选择优的细胞因子组合力案体外制备CIK细胞,为基于CIK细胞的肿瘤免疫治疗提供有价值的数据.方法 采用Ficoll分离法获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),PBMC加入激发型鼠抗人抗-CD3单抗(1μg/mL)包被的96孔板(2×106孔),各孔中分别按浓度梯度加入激发型抗-CD28单抗0.25μg/mL、0.5μg/mL、1峭/mL,IL-2 0.02万U/mL,0.1万U/mL,0.5万U/mL,IFN-γ50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL,于1、2、3、4、5、6、7d通过细胞计数计算各孔细胞数量,以确定能获得佳增殖效果的低浓度,该浓度即为CIK诱导的合适浓度.获得适浓度后,采用CCK-8掺入法检测不同诱导方案下CIK细胞体外增殖能力,采用流式细胞术观察在活化的于1、3、5、7d不同诱导方案下CIK上CD4+、CD8+、CD56+的表达.结果 PBMC在细胞因子作用下均能增殖,加入细胞因子后培养至4-5d时,可见细胞体积逐渐增大,培养至7d细胞的胞体和胞核均增大,胞浆增多,胞核密度加强.细胞增殖曲线提示,在抗-CD3单抗浓度为1μgmL下抗-CD28单抗、IL-2、IFN-γ的适浓度分别为0.5 μg/mk,、0.1万U/mL、100ng/mL.CCK法和流式细胞术分析显示,各组CIK细胞随着培养时间的延长增殖愈显著,且组间呈现统计学差异,各组中以抗-CD3+抗-CD28+IL-2+ IFN-γ联合培养组CIK细胞体外增殖能力强(P＜0.05),CD4+、CD8+和CD56+细胞比例培养前分别为(44.8±11.3)％、(21.1±8.5)％、(3.4±0.7)％,培养后分别为(72.1±13.8)％、(51.1±17.9)％、(10.7±4.4)％,比较均有差异性(P＜0.05).结论 采用激发型抗-CD3+抗-CD28+IL-2+ IFN-γ联合培养方案获得的CIK细胞体外增殖能力强,表型为成熟.
友情链接