期刊简介

               本杂志系中华人民共和国卫生主管,中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物,中文临床、特种医学类核心期刊,中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康,以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就,多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。                

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  • 杂志名称:中国输血杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
  • 国际刊号:1004-549X
  • 国内刊号:51-1394/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
中国输血杂志2015年第07期

用合成肽制备鼠源性抗-GPB单克隆抗体及特性鉴定

郭忠慧;李勤;王晨;朱自严

关键词:GPB, 合成肽, 单克隆抗体
摘要:目的 用合成肽作为免疫原,制备针对血型糖蛋白GPB的单克隆抗体细胞株.方法 合成人血型糖蛋白GPBs上1段由GPB蛋白第17-36位氨基酸构成的肽段17TKSYISSQTNGETGQLVHRF36,用钥孔虫血蓝(KLH,keyhole limpet hemocyanin)载体蛋白联接的合成多肽免疫BALB/e小鼠.采用杂交瘤技术制备鼠源单克隆抗体,经选择培养和有限稀释亚克隆后,ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株,健康小鼠腹腔接种阳性杂交瘤细胞,制备小鼠腹水,谱红 细胞凝集试验、酶处理红细胞、特定稀有血型红细胞凝集试验,以及蛋白免疫印记(Western-Blotting)等技术鉴定抗体特异性;鼠源mAb亚类试剂盒鉴定抗体IgG亚型.结果 ELISA筛选获得阳性单抗细胞株1株,经鼠源mAb亚类试剂盒鉴定,所制备的单克隆抗体属于IgG3,Kappa型轻链.其小鼠腹水制备液与所有谱红细胞在盐水和抗鼠球蛋白介质中均产生凝集(包括Ss,SS,ss,MM,MN,NN表型),与稀有的MkMk细胞不发生凝集.腹水制备液与经木瓜酶、菠萝酶、无花果酶和胰蛋白酶处理的O型红细胞反应,凝集强度与非酶处理红细胞无明显改变.Western-Blotting杂交试验显示小鼠腹水稀释液与红细胞膜蛋白的杂交条带位于GPB的位置.结论 制备1株可分泌抗-GPB mAb的杂交瘤细胞株,为进一步的实验研究奠定了基础.