期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管,中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物,中文临床、特种医学类核心期刊,中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康,以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就,多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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- 杂志名称:中国输血杂志
- 主管单位:中华人民共和国卫生部
- 主办单位:中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号:1004-549X
- 国内刊号:51-1394/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
一种适合中国地区HBV流行特征的荧光定量PCR检测方法的初探
刘晓;欧国进;李玲;王珏;刘忠
关键词:HBV流行特点, HBV引物探针, 荧光定量PCR, 中国地区
摘要:目的 设计1套适合中国地区HBV流行特征的高灵敏度、高特异性的HBV引物探针,建立HBV荧光定量检测的方法.方法 在NCBI的Nucletide中输入HBV、China、complete genome等关键词找到中国地区的HBV序列,经比对后在保守序列设计引物探针,引物扩增的PCR产物经PMD-19载体连接制备成质粒标准品并测序验证序列,计算质粒拷贝数,将质粒标准品稀释成不同浓度的质粒标准品,用第三方标准品对质粒标准品做校正,绘制HBV标准曲线,并用Probit分析计算检测下限,验证灵敏度、特异性等.将所建立的HBV荧光定量检测方法检测100例标本,并与罗氏cobas(R) TaqScreen MPX Test,version 2.0检测试剂盒检测结果做相关性分析.结果 引物探针特异性好,质粒测序结果与目的产物完全吻合,质粒标准品曲线R2>0.999,扩增效率为95.43%,线性范围(2×102-2.5×109) IU/mL,95%检测下限为16.2 IU/mL,批内重复变异系数为0.15%-1.11%,批间变异系数为0.91%-4.67%.与罗氏检测结果相关性高(R=0.96).结论 成功设计出1对适合中国HBV流行特征的引物探针,所建立的HBV荧光定量检测的方法灵敏度高、特异性好、重复性好,为在对中国地区开展血液HBV DNA载量检测及监控提供了技术支撑.
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