期刊简介
本杂志系中华人民共和国卫生主管，中国输血协会与中国医学科学院输血研究所主办的国内输血医学专业唯一公开发行的国家级学术刊物，中文临床、特种医学类核心期刊，中国生物医学核心期刊。报道有关输血的临床实践、基础研究、献血与健康，以及血液制品的开发与生产等方面的最新成就，多角度地客观反映国内输血医学及输血科学的进展与水平。
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- 杂志名称：中国输血杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中国输血协会 中国医学科学院输血研究所
- 国际刊号：1004-549X
- 国内刊号：51-1394/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中文临床医学、特种医学类核心期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中)
PCR检测血小板细菌的引物设计与筛选
张燕；方建华；李建斌
关键词：血小板细菌, PCR引物, 核酸检测, 细菌含量
摘要：目的 设计PCR检测血小板细菌的通用引物, 评价其在血小板检测中的应用效果.方法 在美国国家生物技术信息中心 (NCBI) 中找到不同细菌中同一片段基因16Sr DNA序列, 对其做多序列比对, 确定合适的保守区域;使用Primer 5.0设计3对引物探针, 采用荧光定量PCR对不同浓度[ (101—107) CFU/m L]的标准菌株扩增, 通过分析扩增曲线来判断扩增效果.分别将配制后经血小板稀释为101、102、103、104、105、106、107CFU/m L的菌悬液在22℃震荡培养24 h, 以荧光定量PCR检测细菌;筛选出灵敏度和特异性好的引物作为终引物.结果 血小板常见菌做荧光定量PCR检测[对 (101—107) CFU/m L的细菌重复检测>3次]后, 通过对检测灵敏度和特异性的比较, 发现第3号组引物 (16S-F3:CAACGCG■AACCTTAC, 16S-R3:AACC■CATTTCACAACA) 不但能避免背景和非特异物的产生, 而且能识别低含量的目标DNA, 检测的细菌浓度范围含量为 (102—108) CFU/m L.结论 细菌通用引物的设计与筛选为血小板细菌的核酸检测方法的建立起到了关键的作用.
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